RT - Journal Article T1 - The secretory expression of the organophosphorus compound degrading enzyme with industrial and military uses in Bacillus subtilis bacteria JF - npwjm YR - 2017 JO - npwjm VO - 5 IS - 15 UR - http://npwjm.ajaums.ac.ir/article-1-422-fa.html SP - 25 EP - 30 K1 - organophosphorous K1 - B. subtillis WB800 K1 - secretory expression K1 - opd B enzyme AB - مقدمه: ارگانوفسفات نام عمومی استرهای اسید فسفریک است که در زمینه های مختلف بخصوص حوزه نظامی کاربرد دارند. با توجه به اینکه تولید و استفاده از سلاح های شیمیایی در جنگ های نوین چشمگیر می باشد، لذا مطالعه و پژوهش در زمینه شناسایی، پیشگیری و درمان آلودگی با این ترکیبات امری ضروری است. این ترکیبات اثرات منفی زیادی بر سیستم بیولوژیک بدن موجودات زنده دارند. مطالعات نشان داده تجزیه بیولوژیک این ترکیبات بهینه ترین روش برای امحای این ترکیبات است. آنزیم های مختلفی از جمله آنزیم opdB، برای تجزیه این ترکیبات شناسایی شده اند. مواد و روش ها: ژن این آنزیم با تکنیک PCR از ژنوم باکتری لاکتوباسیلوس برویس ATCC367 تکثیر شد. محصول PCR بدست آمده در وکتور pWB980 کلون گردید. سوش باکتریایی باسیلوس سوبتیلیس مستعد با وکتور نوترکیب ترانسفرم شدند. بیان ترشحی پروتئین در محیط بسیار غنی با تکنیک SDS- PAGE بررسی شد. فعالیت آنزیم به کمک اندازه گیری جذب ترکیب ارگانوفسفره کلروپیریفوس مصرفی و تخمین میزان مصرفی آن در مدت زمان تعیین شده در طول موج 276 نانومتر بررسی شد. نتایج: باند پروتئینی 27 کیلودالتون بر روی ژل SDS-PAGE مشاهده شد. فعالیت آنزیم Unit/mL 83/10 تخمین زده شد. بحث: سوش نوترکیب حاصل، قادر به تولید ترشحی آنزیم کارآمد و فعال می باشد. LA eng UL http://npwjm.ajaums.ac.ir/article-1-422-fa.html M3 ER -